Revista Bioquímica y Patología Clínica B y PC
Volumen 69 N° 3

Detección del polimorfismoC677 de la metilentetrahidrofólicoreductasa (MTHFR)

El método utilizado es PCR-RFLP y la muestra requerida para su realización es sangre entera anticoagulada con EDTA.
A partir de los leucocitos de la misma se extrae el ADN que se maplifica por PSR, obteniéndose un fragmento de 198pb.
El producto amplificado se somete a digestión con la enzima de restricción Hinf I.
Los fragmentos resultantes pueden ser:
Polimorfismo homocigota normal(CC): 198pb
Polimorfismo hoterocigota (CT): 198 + 175+ 23 pb
Polimorfismo homocigota asociado a hiperhomosisteinemia (TT): 175 + 23 pb

El producto amplificado digerido se corre junto a un marcador de peso molecular comercial en un gel de agarosa 2.5% teñido con bromuro de etidio. Luego se observa bajo lámpara UV y esta es una fotografía del gel.

(1) Marcador de peso molecular
(2) Polimorfismo CC
(3) Polimorfismo CT
(4) Polimorfismo TT

Es importante aclarar que la banda de 23 pb no se observa debido a que difunde en el gel por tener escaso tamaño.

Realizado en el Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari Universidad de Buenos Aires

Autores:
Faixas ML1,
Manginelli Y1,
Strada Agodino ML 1,
Galarza P2,
Perusco A2,
Correa G3.

1- Residencia Bioquímica - Area Diagnóstico Bioquímico
2- División Histocompatibilidad e Inmunogenética - Area Diagnóstico Bioquímico
3- División Hematología - Area Diagnóstico Bioquímico