
Revista Bioquímica y Patología Clínica B y PC
Volumen 69 N° 3
Detección del polimorfismoC677
de la metilentetrahidrofólicoreductasa (MTHFR)
El método utilizado es PCR-RFLP y la muestra requerida para su
realización es sangre entera anticoagulada con EDTA.
A partir de los leucocitos de la misma se extrae el ADN que se maplifica
por PSR, obteniéndose un fragmento de 198pb.
El producto amplificado se somete a digestión con la enzima de
restricción Hinf I.
Los fragmentos resultantes pueden ser:
Polimorfismo homocigota normal(CC): 198pb
Polimorfismo hoterocigota (CT): 198 + 175+ 23 pb
Polimorfismo homocigota asociado a hiperhomosisteinemia (TT): 175 +
23 pb
El producto amplificado digerido se corre junto a un marcador de peso
molecular comercial en un gel de agarosa 2.5% teñido con bromuro
de etidio. Luego se observa bajo lámpara UV y esta es una fotografía
del gel.
(1) Marcador de peso molecular
(2) Polimorfismo CC
(3) Polimorfismo CT
(4) Polimorfismo TT
Es importante aclarar que la banda de 23 pb no se
observa debido a que difunde en el gel por tener escaso tamaño.
Realizado en el Instituto de Investigaciones Médicas
Alfredo Lanari Universidad de Buenos Aires
Autores:
Faixas ML1,
Manginelli Y1,
Strada Agodino ML 1,
Galarza P2,
Perusco A2,
Correa G3.
1- Residencia Bioquímica - Area Diagnóstico
Bioquímico
2- División Histocompatibilidad e Inmunogenética - Area
Diagnóstico Bioquímico
3- División Hematología - Area Diagnóstico Bioquímico